Комплект реагентов Микро - ГРАМ - НИЦФ
предназначен для дифференциально-диагностической окраски
микроорганизмов путем последовательной обработки мазка,
взятого из биологического материала человека (гной,
мокрота, моча и др.), компонентами комплекта.
Один комплект рассчитан на проведение окраски 100
мазков.
Состав
- генциановый фиолетовый карболовый, готов к
применению —1 флакон (100 мл.)
- фуксин основной карболовый концентрированный—1 флакон (10 мл.)
- раствор Люголя, готов к применению— 1 флакон (100 мл)
Приготовление рабочего раствора фуксина
Внести в пробирку вместимостью 15 мл 1,0 мл фуксина
основного карболового концентрированного (раствор
фуксина ЦИЛЯ), добавить 9,0 мл дистиллированной воды
и перемешать.
Полученный рабочий раствор фуксина (раствор фуксина
Пфейфера) можно хранить при комнатной температуре(+18
-25°С) не более 24ч.
Проведение окраски
На фиксированный мазок наложить кусочек фильтровальной
бумаги, на который налить избыток генцианового фиолетового
карболового и выдержать при комнатной температуре
(+18 -25°С) в течение 1 - 2 мин.
Снять бумагу, слить
краску и, не промывая мазок водой, налить на мазок
0,7 - 1,0 мл раствора Люголя и выдержать мазок
при комнатной температуре в течение 1 - 2 мин.
Слить
раствор Люголя и, не промывая, погрузить стекло
с
мазком в стакан со спиртом этиловым 96°, покачивая
стекло до тех пор, пока с мазка не перестанут
отходить струйки краски (не более 30 сек).
Извлечь
стекло
с мазком из спирта, ополоснуть мазок дистиллированной
водой, залить поверхность мазка раствором фуксина
Пфейфера и выдержать мазок при комнатной температуре
в течение 30 - 60 сек.
Слить краску со стекла,
промыть мазок дистиллированной водой, высушить
стекло с помощью
фильтровальной бумаги или естественной сушкой
в наклонном положении при комнатной температуре
и провести
микроскопию
с использованием иммерсионной системы при
увеличении X (900 — 1000).
Грамположительные микроорганизмы
окрашиваются в фиолетовый или фиолетовый
с
синим оттенком цвет, грамотрицательные микроорганизмы
- в красный цвет.
Условия хранения и эксплуатации
Срок годности фуксина Циля — 12 мес, генциан-виолета
- 12 мес, раствора Люголя -6 мес.
Рабочий раствор фуксина основного (раствор фуксина
Пфейфера) можно хранить при комнатной температуре
не более 24 ч.
После вскрытия флакона генциановый фиолетовый и
раствор Люголя можно хранить при комнатной температуре
не более 6 мес.
Фуксин основной концентрированный (раствор фуксина
Циля) после вскрытия флакона можно хранить при комнатной
температуре в течение всего срока годности (12
месяцев).
|